HIV耐药是致使艾滋病抗病毒医治失利的主要缘由之一。在2020版《天下艾滋病检测手艺标准》持续包罗艾滋病耐药检测的内容,对于艾滋病耐药检测咱们要领会的哪些内容呢?
甚么是艾滋病耐药?
也称艾滋病病毒(HIV)耐药,是指由HIV遗传变异引发的、匹敌病毒药物按捺感化敏理性下降或不敏感的景象。
艾滋病耐药从何而来?
(1)间接传染 当传染的毒株为HIV耐药毒株时,即发生了原发性耐药,也称传布性耐药。
(2)药物挑选 HIV是一种复制速率快且极易变异的病毒,在不抗病毒药物时,HIV耐药渐变株会随机呈现,但不复制上风,不会在体内堆集;在抗病毒医治时,当药物浓度缺乏时,HIV复制不能被完整按捺,HIV耐药渐变株的复制上风会闪现出来,继而耐药渐变株逐步堆集增加,从而发生继发性耐药,也称取得性耐药。
艾滋病耐药若何检测?
(1)基因型检测 经由进程测序或基因芯片杂交等方式,检测HIV基因组中是不是有耐药相干渐变。基因型检测凡是操纵测序法,检测流程以下:以HIV的基因组RNA为模板,逆转录PCR扩增目标基因片断,测序取得HIV基因序列,与野生型序列停止比对,判定是不是有耐药相干基因渐变,再经由进程耐药数据库的算法联系关系耐药水平。样本范例可为血浆和干血斑。测序方式凡是接纳Sanger测序法,跟着测序手艺的成长,也逐步起头操纵深度测序法。
(2)表型检测 又称体外药敏尝试,以50%按捺浓度(IC50)来表现,将待测毒株与野生型毒株的IC50比拟,经由进程倍数转变(Fold change,FC)来评价耐药水平。待测病毒可为间接从传染者体内PBMC平分离培育的病毒,也可为含传染者HIV基因的重组病毒。
普通来讲,基因型检测的操纵更简略,并且检测周期短,以是在临床上操纵得更多,可是表型检测针对庞杂渐变和新型药物的耐药检测更有上风。
基因型耐药检测成果若何看?
(1)耐药渐变的表现方式:耐药渐变是HIV基因核苷酸序列的变更,但接纳氨基酸的变更来表现,格局以下:野毒株的氨基酸+氨基酸的地位+渐变后的氨基酸,如K103N,是HIV逆转录酶的第103位氨基酸从赖氨酸(K)渐变为天冬酰胺(N)。
(2)耐药诠释体系:指具备耐药水平算法的数据库,经由进程算法可将耐药渐变成果转换为耐药水平。比方,在操纵较广泛的Stanford HIVdb耐药诠释体系中,K103N渐变的耐药水平为对奈韦拉平(NVP)和依非韦伦(EFV)高度耐药。
HIV耐药检测的注重事变
(1)检测机会:由于HIV极易渐变,当耐药患者停药或间断医治时,体内不抗病毒药物时,野生株的复制上风闪现并逐步堆集,最初将检测不出耐药,是以耐药检测的最好机会为患者正在抗病毒医治时,或间断医治一个月内。
(2)警戒样本间穿插净化,检测进程中须要设置空缺和阳性对比,并经由进程序列退化树阐发,解除穿插净化。
(3)未检出耐药渐变时,不解除比例较低的耐药毒株存在。这是由于当耐药毒株在个别内病毒准种中的比例低于10~20%时,操纵Sanger测序法凡是检测不到其存在。